脳脊髄液 (CSF) 分析は、出血、炎症、感染、腫瘍、その他の臨床症状など、中枢神経系内で発生するさまざまなプロセスの検出を強化するための強力なツールです。さらに、CSF 中の化合物 (ホルモン、薬物、神経伝達物質、バイオマーカー、代謝産物、ウイルスなど) の連続評価は、基礎研究とトランスレーショナル研究の両方において同様に重要です。中枢神経系におけるCSFの量は、分泌と吸収によって安定に維持されます。
I.運用上の考慮事項
CSFは通常、脳室または腰椎穿刺のいずれかを介して収集されます。ヒト以外の霊長類では、腰椎穿刺による合併症のリスクは比較的低くなります。これは、ほとんどの種で腰椎穿刺部位が脊髄の端から離れているためです。-適切な麻酔と、剃毛などの部位の準備や滅菌材料の使用を含む無菌技術が必要です。少なくとも滅菌手袋、注射器、針を使用し、滅菌手術用ドレープを考慮する必要があります。 ＣＳＦ採取は通常、側臥位、胸臥位、または座位で行われ、脳室へのアクセスを改善したり、首や脊椎の屈曲によって椎間腔を拡大したりします。選択した針のサイズと長さは、ヒト以外の霊長類の種とサイズに適したものでなければなりません。{6}}手術中に使用される技術、器具、消耗品、周術期のケアは、動物種、研究目的、臨床獣医師の好みによって異なります。
一部の研究プロトコールでは、長期間にわたってCSFを継続的に収集すること、または無麻酔の被験者からCSFサンプルを収集することが必要な場合があります。これらのプロトコルでは、皮下収集ポートに接続された長期間埋め込まれた CSF カテーテルを介して、覚醒しているアカゲザルからの継続的な CSF 収集を実現できます。-
著者は、総CSF量、硬膜穿刺の制限または推奨事項、採取頻度、安全な採取量、およびCSF補充率に関する最新の参考文献を見つけるためにあらゆる努力を払ってきた。この側面に関する文献は、ヒト以外の霊長類のほとんどについては限られています。-さらに、非ヒト霊長類獣医協会の会員からの調査によると、さまざまな機関が CSF 収集に異なる方法を使用して成功していることが示されているため、収集方法も異なります。{3}したがって、著者は既存の最良の証拠に基づいて CSF 採取に関する考慮事項と推奨事項を提供します。
参考までに、これまでの研究では、成体雄アカゲザル（8.0-10.6 kg）の見かけのCSF量は10+/-0.06 mL、CSF流量は0.018+/-0.003 mL/minであると決定されています。アカゲザルにおけるCSF形成速度は28.6～44.2μL/分の範囲にあります。より有益な推奨事項の開発を促進するには、この分野で非ヒト霊長類に関するさらなる研究が必要です。
II.潜在的な副作用
ヒト以外の霊長類で CSF 採取中に合併症が発生することはまれですが、解剖学的変異や不適切または不十分な技術的手法により、サンプルの損傷や、出血、ヘルニア、感染、脳幹、脊髄、神経根の損傷、動物の不快感などの合併症が発生する可能性があります。{0}これらの合併症はまれですが、動物福祉を損なう可能性があります。
リスクが伴うため、CSF は獣医師または訓練を受けた獣医師が採取する必要があります。 CSF 採取の試みが失敗した場合、実践方法は異なる場合があります。 1 人の個人による失敗は 3 回まで許容されるのが一般的です。 3 回目の試行が失敗した後は、資格のある別の担当者が引き継ぐ必要があります。 2 人目の患者が 3 回試みても CSF を採取できない場合は、その試みを中止する必要があります。その間、動物は適切な鎮痛治療を受け、麻酔から回復します。試みが失敗した後に収集部位を変更する（例えば、脳室から腰部へ）と、成功することが多い。画像誘導なしで試みが失敗した場合は、透視装置を使用して針を留置することができます。-画像ガイダンスは成功率を高めるだけでなく、外傷性穿刺の発生率も減らすことができます。
術後のモニタリングは、動物がケージに戻り、サポートなしで直立姿勢を維持できるようになるまで継続する必要があります。動物のモニタリングは少なくとも 24 時間継続するか、動物管理使用委員会 (IACUC) によって承認されたプロトコールに従って行う必要があります。モニタリングには、基本的な生理学的、行動的、および運動パラメータの評価が含まれる必要があります。無気力、うつ病、昏睡、頭を圧迫する兆候などを含むがこれらに限定されない、神経機能障害の兆候を特に評価する必要があります。 CSF採取後の頭痛とそれに伴う頭蓋内圧低下は人間の医学では珍しいことではありません。ヒト以外の霊長類ではこの潜在的な合併症を考慮して、鎮痛治療は手術中に提供され、術後 2 ～ 3 日間継続されるか、頭痛または脊椎痛に関連する行動に関する術後の観察に基づいて必要に応じて継続される必要があります。最も効果的な鎮痛療法には、術前に開始される包括的な治療が含まれる場合があります。
Ⅲ． IACUC の考慮事項と記録の保管
IACUC は、CSF 採取とあらゆる潜在的な合併症に関連する手順を熟知し、少なくとも年に 1 回それらを見直す必要があります。薬剤の投与量、術前準備、採取した CSF 量、採取頻度、短期および長期の術後の回復などのすべての関連情報は、IACUC プロトコルに記載され、医療記録や検査記録に適切に文書化される必要があります。-
CSF は研究プロトコルにおいて重要なデータである可能性がありますが、不適切な収集技術は動物福祉に影響を与える可能性があります。プロトコールを提出する際には、収集の数と頻度についての科学的根拠を提供する必要があります。具体的には、IACUC は CSF 採取に関する各提案を慎重に評価し、以下を考慮する必要があります。
1.CSF の収集は、プロトコルで概説されている科学的目的を達成するために不可欠ですか?
2.利用可能な代替方法および低侵襲性の中枢神経系評価方法（画像技術など）はありますか?もしある場合、それらは検討されましたか?
3.オペレーターは適切な訓練を受け、十分なスキルを持っていますか?
4.適切な周術期麻酔と鎮痛計画が提供されますか?麻酔と鎮痛計画については、実験動物の獣医師と相談する必要があります。
5.採取したCSF量は動物の年齢と大きさを考慮していますか?
6.硬膜穿刺の回数と頻度は動物にとって適切であり、合併症のリスクは最小限に抑えられていますか?複数の CSF 採取が研究の一部である場合、各動物の最大採取時間を指定する必要があります。
7.術後のモニタリング計画は適切ですか？
8.考えられるすべての術後合併症が考慮され、安楽死を含むすべての合理的な介入が列挙されていますか?
